Трансфекция клеток mcf-7 генами криптобиотической хирономиды polypedilum vanderplanki - polpoz.ru o_O
Главная
Поиск по ключевым словам:
страница 1
Похожие работы
Название работы Кол-во страниц Размер
Лекция с использованием компьютерной презентации. Индивидуальное... 1 65.28kb.
Исследование роста и развития в культуре эпителиальных клеток слизистой... 1 97.1kb.
Биологические особенности трансформации плазматических клеток и лабораторная... 1 312.83kb.
Цитология 1 135.71kb.
Наука о любых проявлениях жизни 1 264.82kb.
Баторов егор васильевич Влияние мезенхимальных стромальных клеток... 1 350.75kb.
Тема: органы кроветворения и иммунной защиты 1 107.35kb.
3. Наука, изучающая строение человеческого тела его органов, тканей... 1 25.77kb.
Кобзева Ирина Владимировна комплексная оценка качества криоконсервированных... 13 1749.22kb.
9 класс, биология Сравнение строения клеток бактерий, растений и... 1 77.3kb.
Конспект занятия 23 Ход занятия 1 58.88kb.
Рабочая учебная программа по дисциплине «история франции» для специальности... 1 122.52kb.
1. На доске выписаны n последовательных натуральных чисел 1 46.11kb.

Трансфекция клеток mcf-7 генами криптобиотической хирономиды polypedilum vanderplanki - страница №1/1

ТРАНСФЕКЦИЯ КЛЕТОК MCF-7 ГЕНАМИ КРИПТОБИОТИЧЕСКОЙ ХИРОНОМИДЫ POLYPEDILUM VANDERPLANKI

Блатт Н.Л., Гусев О.А., Кикавада Т., Ризванов А.А.

Научный руководитель: Ризванов А.А., д.б.н.

Институт фундаментальной медицины и биологии, Казанский (Приволжский) федеральный университет, г. Казань, Россия

Национальный Институт Агробиологических Науки, Цукуба, Япония

В настоящее время в мире активно проводятся работы по разработке методов безводного хранения клеток и тканей для биомедицинского применения. В рамках работы над расшифровкой генома африканской хирономиды Polypedilum vanderplanki (Diptera, комары-звонцы) были успешно определены наборы генов этого насекомого, участие которых непосредственно определяет успешность выживания при обезвоживании. Целью нашего проекта является исследование влияния экзогенно экспрессии генов стрессоустойчивости хирономиды на биологические свойства клеток человека.



С помощью стандартных методов генной инженерии кДНК генов, кодирующих белки устойчивости к высыханию (шапероны: LEA4, LIL13, P26, SLEEPLESS-LIKE, антиоксиданты: TRX7, TRX6, SOD5, SOD3 и белки предотвращающие старение белковых цепей: PIMT7, PIMT1), были субклонированы в двухкассетный экспрессионный эукариотический плазмидный вектор pBudCE4.1 (Инвитроген). Гены стрессоустойчивости были клонированы под контролем промотора EF1a и содержали С-концевые последовательности фьюжен тэгов (myc His-Tag). Во вторую кассету клонирован репортерный ген зеленого флуоресцентного белка GFP под контролем раннего промотора CMV. Клетки рака молочной железы человека MCF7 были трансфицированы плазмидной ДНК с помощью реагента Lipofectamine 2000 (Инвитроген). Через 36 часов эффективность трансфекции была оценена по экспрессии в клетках белка GFP. Морфология клеток, трансфицированных экспрессионными плазмидными векторами, не отличалась от морфологии контрольных нетрансфицированных клеток, что свидетельствует об отсутствии токсического влияния рекомбинантных белков.

В дальнейшем планируется исследование влияния экзогенной экспрессии белков криптобиотического организма на устойчивость генетически модифицированных клеток человека к обезвоживанию, заморозке и тепловому шоку. Полученные данные помогут понять роль исследуемых белков в процессе адаптации организмов к неблагоприятным условиям окружающей среды и лягут в основу нового направления биомедицинских и биотехнологических технологий безводного хранения культур клеток, тканей, лекарственных веществ и биопрепаратов.